Cele mai bune practici pentru depozitarea peptidelor
Pentru a păstra integritatea rezultatelor de laborator, depozitarea corespunzătoare a peptidelor este esențială. Practicile corecte de depozitare pot menține peptidele timp de ani de zile și pot proteja împotriva contaminării, oxidării și degradării care pot face peptidele și, prin urmare, experimentele inutile. Deși unele peptide sunt mai susceptibile la degradare decât altele, cunoașterea și implementarea celor mai bune practici pentru depozitarea peptidelor poate prelungi considerabil stabilitatea și integritatea acestora, indiferent de compoziție.
Odată ce peptidele au fost primite, este imperativ ca acestea să fie păstrate la rece și ferite de lumină. Dacă peptidele vor fi utilizate imediat sau în următoarele zile, săptămâni sau luni, refrigerarea pe termen scurt la 4°C (39°F) este în general acceptabilă. Peptidele liofilizate sunt de obicei stabile la temperatura camerei timp de câteva săptămâni sau mai mult, așa că, dacă vor fi utilizate în câteva săptămâni sau luni, o astfel de depozitare este de obicei adecvată.
Totuși, pentru depozitarea pe termen lung (câteva luni până la ani), este mai preferabil să se depoziteze peptidele într-un congelator la -80°C (-112°F). Atunci când se depozitează peptide timp de luni sau chiar ani, congelarea este optimă pentru a păstra stabilitatea peptidei.
În plus, este important să se evite ciclurile repetate de congelare-dezghețare. Acest lucru poate crește susceptibilitatea peptidei la degradare. De asemenea, trebuie evitate congelatoarele fără îngheț pentru depozitarea peptidelor, deoarece temperaturile pot fluctua considerabil în timpul ciclurilor de decongelare.
Prevenirea oxidării și a contaminării cu umiditate
Este imperativ să evitați contaminarea peptidelor atât cu aer, cât și cu umiditate. Contaminarea cu umiditate este deosebit de probabilă atunci când se utilizează o peptidă imediat după scoaterea acesteia din congelator. Pentru a preveni absorbția umidității din aer pe suprafața rece a peptidei sau pe interiorul recipientului, lăsați peptida să ajungă la temperatura camerei înainte de deschidere.
De asemenea, este extrem de important să se minimizeze expunerea peptidei la aer. Prin urmare, recipientul unei peptide trebuie ținut închis cât mai mult posibil. După ce cantitatea necesară de peptidă a fost îndepărtată, resigilarea recipientului sub o atmosferă de gaz uscat, inert (cum ar fi azot sau argon) va reduce la minimum potențialul ca peptida rămasă să se oxideze. Peptidele cu secvențele C (cisteină), M (metionină) și W (triptofan) sunt deosebit de predispuse la oxidarea la aer.
Deoarece decongelarea și recongelarea frecventă, precum și expunerea la aer pot reduce considerabil stabilitatea pe termen lung a unei peptide, mulți cercetători preferă să determine cantitatea de peptidă necesară pentru fiecare experiment și apoi să distribuie această cantitate în flacoane separate, după cum este necesar. Aceasta este o măsură preventivă extrem de utilă împotriva degradării peptidelor.
Depozitarea peptidelor în soluție
Termenul de valabilitate al soluțiilor de peptide este mult mai scurt decât cel al peptidelor liofilizate, iar peptidele depozitate în soluție sunt, de asemenea, vulnerabile la degradarea bacteriană. Peptidele care conțin Cys, Met, Trp, Asp, Gln și Glu N-terminal în secvențele lor au termene de valabilitate deosebit de scurte atunci când sunt în soluție.
Cu toate acestea, dacă peptidele trebuie neapărat depozitate în soluție, trebuie utilizate soluții tampon sterile la pH 5-6, iar soluția de peptide trebuie separată în alicote pentru a evita congelarea și decongelarea repetate. Soluțiile de peptide sunt în general stabile până la 30 de zile atunci când sunt refrigerate la 4°C (39°F), dar acele peptide cu instabilitate inerentă trebuie păstrate congelate atunci când nu sunt utilizate.
Recipiente pentru depozitarea peptidelor
Recipientele pentru depozitarea peptidelor trebuie să fie complet curate, transparente și solide din punct de vedere structural. De asemenea, acestea trebuie să fie rezistente chimic și dimensionate corespunzător pentru cantitatea de peptidă din ele. Se utilizează în mod obișnuit atât flacoane din sticlă, cât și flacoane din plastic; flacoanele din plastic variază între cele compuse din polistiren și cele din polipropilenă. Flacoanele de polistiren sunt în general transparente, dar nu rezistente chimic; cu toate acestea, flacoanele de polipropilenă sunt în general translucide, dar rezistente chimic.
Deși flacoanele de sticlă de înaltă calitate oferă toate caracteristicile dorite pentru un recipient de depozitare a peptidelor, peptidele sunt uneori expediate în flacoane de plastic pentru a le proteja împotriva spargerii. Totuși, peptidele pot fi întotdeauna transferate dintr-un recipient de plastic într-unul de sticlă sau invers, dacă este necesar.
Instrucțiuni pentru depozitarea peptidelor: sfaturi generale
Când depozitați peptide, nu uitați să:
• Depozitați peptida într-un loc răcoros, uscat și întunecat
• Evitați congelarea și decongelarea repetată a peptidelor
• Evitați supraexpunerea la aer
• Evitați expunerea la lumină
• Evitați depozitarea peptidelor în soluție pe termen lung
• Alicotați peptidele conform cerințelor experimentale